人肥胖抑制素(Obestatin)elisa試劑盒基本介紹

肥胖抑制素是美國(guó)斯坦福大學(xué)的研究人員在Science近年發(fā)現(xiàn)的，他在雜志上生成找到了一種可抑制饑餓感的激素, 是人體內(nèi)基因會(huì)誘發(fā)產(chǎn)生的兩種作用*相對(duì)的激素。而且，研究人員已經(jīng)對(duì)這種被稱(chēng)為“肥胖抑制素（Obestatin）”的激素進(jìn)行了測(cè)試，抑制肥胖效果很理想。

肥胖抑制素是一種胃生長(zhǎng)素基因編碼的生物活性多肽，可以拮抗胃生長(zhǎng)素的食欲刺激作用．肥胖抑制素是一種可以誘發(fā)食欲的腦腸激素，其生物活性依賴(lài)于前體原翻譯后的剪切和乙?；揎椇笮纬梢环N具有生物活性的多肽。借助于生物信息學(xué)預(yù)測(cè)，胃生長(zhǎng)素前體翻譯后還存在不同剪切方式，提示可能存在著另外一種多肽激素。我們從大鼠的胃組織中成功分離出這種激素，命名為肥胖降脂素（肥胖抑制素）（obestatin）——其中“obe”是拉丁來(lái)源的詞匯“obese（肥胖）”的縮寫(xiě)，表示大量攝食，而“statin”則表示“抑制”。與胃生長(zhǎng)素刺激食欲的作用相反，用肥胖降脂素（肥胖抑制素）處理大鼠后，發(fā)現(xiàn)大鼠攝食量和空腸收縮次數(shù)減少，體重增加速度變緩。肥胖降脂素（肥胖抑制素）可與孤兒G蛋白受體GPR39結(jié)合。由同一個(gè)胃生長(zhǎng)素基因編碼，經(jīng)過(guò)翻譯后的不同片斷剪切和不同類(lèi)型的修飾（胃生長(zhǎng)素乙?；揎? 肥胖降脂素（肥胖抑制素）C末端酰胺化）產(chǎn)生的兩個(gè)多肽激素對(duì)體重調(diào)節(jié)卻起著相反的作用?！》逝忠种扑厥峭ㄟ^(guò)對(duì)人體內(nèi)存在著一種被稱(chēng)為“Grelin”的激素來(lái)發(fā)揮作用的。它主要存在于我們的胃部并且會(huì)增強(qiáng)食欲?？茖W(xué)家們認(rèn)為，Grelin曾幫助原始人類(lèi)成功地存活了下來(lái)：這種激素會(huì)促使我們的祖先在那個(gè)頻繁遭遇饑餓威脅的年代大量消耗掉富余的食物。不過(guò)，在現(xiàn)代的發(fā)達(dá)國(guó)家中，這種激素的過(guò)量存在可能會(huì)導(dǎo)致人體發(fā)胖，所以，通過(guò)肥胖抑制素可以有效地減小人體發(fā)胖的幾率。

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ELISA試劑盒即酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)，是一種常用的固相酶免疫測(cè)定辦法。 因?yàn)镋LISA辦法活絡(luò)，特異性強(qiáng)不需要特殊設(shè)備，所以被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA測(cè)定中影響要素較多，并且其操作中有一定的技能請(qǐng)求，在臨床查驗(yàn)中除正常反響外，有時(shí)?？梢?jiàn)到一些過(guò)錯(cuò)成果（即假陽(yáng)性或假陰性）如標(biāo)本的影響上海勁馬為我們解讀ELISA檢查的影響要素。

標(biāo)本的影響

溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清選用ELISA法檢查易發(fā)生假陽(yáng)性。也許是溶血血清中富含過(guò)氧化酶物質(zhì)（紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素），ELISA試劑盒在洗刷過(guò)程中往往難以*洗脫，它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧（O），從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì)，即顯藍(lán)色，發(fā)生假陽(yáng)性。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。

標(biāo)本受細(xì)菌污染。因菌體中也許富含內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶，因而，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣，亦可發(fā)生非特異性顯色而攪擾測(cè)定成果。

ELISA試劑盒標(biāo)本保留不妥。在冰箱中保留過(guò)久的標(biāo)本，在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)致使本底過(guò)深、形成假陽(yáng)性；為戰(zhàn)勝上述攪擾，ELISA試劑盒測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮收集；如不能當(dāng)即測(cè)定，5 d內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃，1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)有些濃縮，散布不均，應(yīng)充沛混合后再測(cè)定，但混勻時(shí)應(yīng)輕柔，不行激烈振動(dòng)。

塑料試管能吸附抗原物質(zhì)，樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量降低形成假陰性。運(yùn)用真空采血管；并運(yùn)用非抗凝標(biāo)本，肝素抗凝血漿會(huì)添加OD值，EDTA、酶抑制劑（如NaN3）可抑制ELISA體系中辣根過(guò)氧化物酶活性。

ELISA試劑盒標(biāo)本凝結(jié)不全。 在工作中，有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢查，ELISA試劑盒常在血液還未開(kāi)始凝結(jié)時(shí)即強(qiáng)行離心別離血清，使血清中仍殘留有些纖維蛋白原，在ELISA測(cè)定過(guò)程中能夠形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊，易形成假陽(yáng)性成果；因而血液標(biāo)本收集后有必要使其充沛凝結(jié)后再別離血清。

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