α-葡萄糖苷酶（α-GC）檢測(cè)試劑盒五一*

測(cè)定意義：α-GC(EC 3.2.1.20)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化水解芳基或烴基與糖基之間的α-糖苷鍵生成葡萄糖，不僅與細(xì)胞壁的松弛或加固有關(guān)，而且與細(xì)胞識(shí)別和一些信號(hào)分子產(chǎn)生密切相關(guān)。

根據(jù)國(guó)際生化聯(lián)合會(huì)(IVB)采納的酶學(xué)委會(huì)(EC)提出的系統(tǒng)命名及系統(tǒng)分類(lèi)將酶分為6大類(lèi)：氧化還原酶、轉(zhuǎn)移酶、裂合酶、異構(gòu)酶、水解酶。α-葡萄糖苷酶為水解酶的一種。測(cè)定酶類(lèi)是臨床生化檢驗(yàn)中常做的項(xiàng)目之一。

測(cè)定原理：α-GC分解對(duì)-硝基苯-α-D吡喃葡萄糖苷生成對(duì)-硝基苯酚，后者在400nm有大吸收峰，通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算α-GC活性。

需要的儀器，耗材:可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

 注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者
增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰
和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的處理：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每 1000 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率 20%，超聲 3 秒，間隔 10 秒，重復(fù) 30 次），15000g，4℃，離心 20min，取上清，置冰上待測(cè)。組織的處理：稱取約 0.2g 組織，加入 1mL 提取液進(jìn)行冰浴勻漿；15000g，4℃，離心 20min，取上清，置冰上待測(cè)。