乙酰膽堿轉移酶檢測試劑盒檢測原理
測定原理
乙酰膽堿轉移酶(choline acetyltransferase ChAT)的測定是以乙酰輔酶A和膽堿為底物,在ChAT的作用下,反應的生成物和顯色劑結合,在324nm處測定吸光度,以此計算ChAT的活力。
樣本前處理:
10%勻漿液的制備:準確稱取組織重量,按重量(g):體積(ml)=1:9的比例,加入9倍體積的生理鹽水,2500轉/分,離心10分鐘,取上清液,再用生理鹽水2倍稀釋后測定。
測定意義:
乙酰膽堿Ach是調節(jié)食道平滑肌運動的主要的興奮性神經遞質。食道平滑肌收縮主要是
由于Ach釋放引起。而乙酰膽堿轉移酶(Choline acety1transferase ChAT)和乙酰膽堿脂酶
Acetycholinesterase ACHE)分別是Ach的合成酶和水解酶,調節(jié)Ach的代謝。食道組織
中這兩個酶的活力代表了食管內源性膽堿能神經功能狀態(tài)。
乙酰膽堿是延髓脊髓運動神經元,自主神經系統(tǒng)神經節(jié)前纖維,神經節(jié)后膽堿能(副交
感神經)纖維,以及中樞神經系統(tǒng)內許多神經元(例如基底節(jié),大腦運動區(qū)皮層)的主要神經
遞質。它是通過膽堿乙酰轉移酶的作用,由膽堿與來自線粒體的乙酰輔酶A所合成。在獲得
釋放后,乙酰膽堿刺激特殊的膽堿能受體,這種相互作用很快被局部的膽堿酯酶所終止,后
者使乙酰膽堿被水解為膽堿與乙酸鹽。乙酰膽堿的水平由膽堿乙酰轉移酶和膽堿的攝取所調
控。