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文章標題《沉默STC2對人結腸癌SW480細胞肝轉移裸鼠模型的影響及作用機制研究》
摘要:目的基于Wnt/β-連環(huán)蛋白(β-catenin)信號通路探討沉默斯鈣素2(STC2)對人結腸癌SW480細胞肝轉移裸鼠模型的影響及作用機制。方法將30只SPF級雄性BALB/c裸鼠隨機分為3組,即pLL3.7-shSTC2組(沉默STC2,以pLL3.7-shSTC2轉染SW480細胞構建),pLL3.7-NC組(陰性對照,以陰性病毒載體轉染SW480細胞構建)和pLL3.7-Con組(空白對照,僅以轉染試劑處理的SW480細胞),每組各10只。建模3周后處死裸鼠,觀察各組裸鼠肝臟標本的轉移瘤情況,肝組織行H-E染色后在顯微鏡下觀察各組的病理改變。采用RT-PCR、免疫組織化學法及蛋白質印跡法(Western blotting)檢測STC2、上皮間質轉化(EMT)及Wnt/β-catenin信號通路相關基因的表達。結果與pLL3.7-NC組、pLL3.7-Con組相比,pLL3.7-shSTC2組的STC2蛋白表達水平明顯降低(P<0.05)。與pLL3.7-shSTC2組相比,pLL3.7-NC組和pLL3.7-Con組裸鼠的肝臟外形不規(guī)則程度、質地脆硬度及轉移瘤的直徑、數(shù)量
蘇木精 — 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術里常用的染色法之一 。蘇木精染液為堿性 ,主要使細胞核內(nèi)的染色質與胞質內(nèi)的核酸著紫藍色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色 。
易于被堿性或酸性染料著色的性質稱為嗜堿性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia );而對堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱為中性(neutrophilia)。
構成組織內(nèi)蛋白質的氨基酸的種類很多,它們有不同的等電點。在普通染色法中,染色液的酸堿度為pH6左右,細胞內(nèi)的酸性物質如細胞核的染色質、腺細胞和神經(jīng)細胞內(nèi)的粗面內(nèi)質網(wǎng)及透明軟骨基質等均被堿性染料染色,這些物質稱為嗜堿性。而細胞質中的其它蛋白質如紅細胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色,這些物質稱為嗜酸型。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度,pH值升高時,則原來被酸性染料染色的物質可變?yōu)槭葔A性;pH值降低時,原來被堿性染料染色的物質則可變?yōu)槭人嵝?。所以說染色液的pH值可以影響染色的反應。